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生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)物質(zhì)的制備保存

更新時(shí)間:2016-11-26  |  點(diǎn)擊率:1142

     生化培養(yǎng)箱一般實(shí)驗(yàn)的對(duì)照有空白對(duì)照、陰性對(duì)照、實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照??瞻讓?duì)照就是生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)基里面一點(diǎn)篩選因子都沒(méi)有,直接涂板,估計(jì)就是LZ做出來(lái)的樣子。陰性對(duì)照就是在篩選的培養(yǎng)基里面涂菌,一般不會(huì)長(zhǎng)細(xì)菌。實(shí)驗(yàn)組略過(guò)。陽(yáng)性對(duì)照按照試驗(yàn)組來(lái)做。

                         
 
     生化培養(yǎng)箱采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長(zhǎng),這些都將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測(cè)室接到水樣后,應(yīng)立即檢測(cè),如因故不能檢測(cè)時(shí),應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。
   
     生化培養(yǎng)箱多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注意:這個(gè)溫度也應(yīng)控制好,既達(dá)到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失),然后貯存于冰箱或暗處備用。濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購(gòu)的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,因此,無(wú)菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對(duì)比菌落的顏色,來(lái)鑒定其穩(wěn)定性。
 
     生化培養(yǎng)箱結(jié)果統(tǒng)計(jì)多管發(fā)酵法的結(jié)果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來(lái)計(jì)算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是“Most Probable Number”的縮寫(xiě),指zui大可能數(shù),它是根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)理論,估計(jì)水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,所以準(zhǔn)確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽(yáng)性數(shù)是非常重要的,否則將導(dǎo)致較大偏差。濾膜法的結(jié)果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來(lái)計(jì)算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所以為便于計(jì)數(shù),減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長(zhǎng)20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。

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